Фактары, якія вызначаюць эфектыўнасць сінтэзу ДНК

У звычайным сінтэзе ДНК, РНК і ненатуральных нуклеінавых кіслот этап зняцця абароны і спалучэння адыгрывае вырашальную ролю.

Этап зняцця абароны заключаецца ў выдаленні групы ДМТ на цвёрдай падтрымцы або 5'-гідраксільнай групы на папярэднім нуклеазідзе з дапамогай арганічнай кіслаты і агаленні гідраксільнай групы для наступнага этапу спалучэння.3% трихлоруксусной кіслаты ў дихлорметане або талуоле ў асноўным выкарыстоўваецца для правядзення стадыі зняцця абароны.Канцэнтрацыя трыхларуцатнай кіслаты і час зняцця абароны (час зняцця блакіроўкі) вызначаюць чысціню канчатковых прадуктаў.Нізкая канцэнтрацыя і недастатковы час дэблокіроўкі пакідаюць групу DMT без рэакцыі, што зніжае выхад і павялічвае колькасць непажаданых прымешак.Працяглы час дэблакіроўкі можа прывесці да дэпурыну сінтэзаваных паслядоўнасцей, утвараючы нечаканыя прымешкі.

Этап злучэння адчувальны да ўтрымання вады ў растваральніках і вільгаці ў паветры.Канцэнтрацыя вады ў сінтэзе павінна быць менш за 40 праміле, лепш менш за 25 праміле.Каб захаваць бязводны сінтэз, сінтэз нуклеінавых кіслот павінен праводзіцца ў асяроддзі з нізкай вільготнасцю, таму мы рэкамендуем нашым кліентам выкарыстоўвацьAmidites растворанага абсталявання, які можа растварыць парашкападобны або масляністы фосфарамідыт у бязводным ацэтанітрыле, каб пазбегнуць кантакту з паветрам.

Фактары, якія вызначаюць эфектыўнасць сінтэзу ДНК5
Фактары, якія вызначаюць эфектыўнасць сінтэзу ДНК4

Паколькі фасфарамідыты лепш раствараюцца ў неводнай сітуацыі, а малекулярныя пасткі адсарбуюць сляды вады ў рэагентах і амідытах, неабходна падрыхтавацьМалекулярныя пасткі.Мы рэкамендуем 2 г сіта для бутэлек з рэагентамі 50-250 мл, 5 г для бутэлек з рэагентамі 250-500 мл, 10 г для бутэлек з рэагентамі 500-1000 мл і 20 г для бутэлек з рэагентамі 1000-2000 мл.

Растварэнне фасфарамідытаў павінна праводзіцца ў інэртнай атмасферы, а замена актыватараў і ацэтанітрылу павінна быць своечасова скончана.Рэагенты для закрыцця і акіслення трэба выкарыстоўваць як мага хутчэй, адкрытыя рэагенты даюць меншы тэрмін захоўвання і меншую актыўнасць падчас сінтэзу.


Час публікацыі: 9 жніўня 2022 г