Асноўны прынцып сінтэзу ДНК

Хімічны сінтэз ДНК заснаваны на стратэгіі цвёрдафазнага сінтэзу і фасфарамідытнай хіміі.У адрозненне ад біялагічнага сінтэзу ДНК, матэрыялам для хімічнага сінтэзу ДНК з'яўляецца ДМТ (4, 4-дыметаксітрытыл) і мадыфікаваны фасфарамідытам дэзаксірыбаксізід, як паказана на малюнку 1. Сінтэз ДНК ажыццяўляецца на цвёрдай падставе (мы можам прапанаваць розныяСлупок алігасінтэзу), г.зн. CPG (шкло з кантраляванымі порамі) і PS (полістырол), і ўвесь сінтэз выконваецца наСінтэзатар ДНК/РНК, якое з'яўляецца нашым асноўным абсталяваннем, мае розныя мадэлі, такія як: аднаканальны сінтэзатар HY, HY-12, HY-192 і г.д., кірунак сінтэзу ад 3' да 5', і нуклеатыд уводзіцца ў цвёрдую апору праз адзін цыкл сінтэзу.Звычайна цыкл сінтэзу змяшчае чатыры этапы: зняцце абароны, спалучэнне, закрыццё і акісленне (малюнак 2).Зняцце абароны ўстаноўлена для выдалення групы ДМТ на цвёрдай падставе або 5'-гідраксільнай групы на папярэднім нуклеазідзе, 3% трыхларацуснай кіслаты ў дыхларметане выкарыстоўваецца ў якасці рэагента для зняцця абароны.Затым дэзаксірыбаксізід, мадыфікаваны фосфарамідытам, падвяргаўся ўздзеянню гідраксільнай групы з дапамогай актыватара, г.зн. 5-этылтыатэтразолу або 4,5-дыцыянаімідазолу, утвараючы фасфітэтрыэфір (III), і ажыццяўляўся этап спалучэння.Стадыя герметызацыі ажыццяўляецца для блакіроўкі гідраксільнай групы, якая не прарэагавала, падчас стадыі спалучэння, каб звесці да мінімуму адукацыю непажаданых паслядоўнасцей дэфектаў.Нарэшце, няўстойлівы фасфатытрыэфір (III) акісляецца да хімічна ўстойлівага фасфатрыэфіру (V) з ёдам у якасці акісляльніка ў прысутнасці пірыдзіну.

Сінтэзаваная ДНК можа быць адшчаплена ад цвёрдага носьбіта шляхам аміналізу, абароненая 2-цыянаэтылам група на фасфартрыэфіры і амід на нуклеабазанні адшчапляюцца адначасова, пласціны для сінтэзу і калонкі для сінтэзу ў стойках размяшчаюцца непасрэдна ў рэакцыйнай камеры. зАбсталяванне для зняцця абароны.Сырая ДНК можа быць падрыхтавана з дапамогай ВЭЖХ, электрафарэзу і OPC па патрабаванні, мы таксама можам даць вамАчышчальнае абсталяваннедля пост-апрацоўкі.